Статья "Оптимизация условий постановки прямого варианта до..."
Наименование статьи | Оптимизация условий постановки прямого варианта дот-иммуноанализа для детекции холерного токсина. |
---|---|
Страницы | 25 |
Аннотация | В результате проведенных исследований установлены оптимальные параметры и условия постановки прямого варианта дот-ИФА на основе поли- и моноклональных пероксидазных конъюгатов для детекции холерного токсина. Вначале проводится сенсибилизация НЦМ (Bio-Rad) супернатантами токсигенных и нетоксигенных холерных вибрионов (разведение 1:2) в 0,01 М буферном растворе ФосСБ рН 7,4 в условиях термостата – 10 минут, при комнатной температуре – 20 минут. Затем следует блокирование свободных сайтов связывания буферным раствором с 1% обезжиренного молока, время экспозиции с поли- и моноклональными пероксидазными конъюгатами 20 мин. при 37 °С и 50 мин. при комнатной температуре. Продолжительность взаимодействия с субстратной смесью – 2 минуты. Оптимизированный вариант дот-ИФА дает возможность сократить время проведения анализа до 90 минут при использовании термостата, а без приборного обеспечения его продолжительность составляет 120 минут. |
Ключевые слова | холерный токсин, дот-иммуноанализ, поликлональные пероксидазные конъюгаты, моноклональные пероксидазные конъюгаты. |
Журнал | Вестник биотехнологии и физико-химической биологии им. Ю.А. Овчинникова |
Номер выпуска | 3 |
Автор(ы) | Якушева О. А., Алексеев Л. П., Архангельская И. В., Кругликов В. Д., Зюзина В. П., Яговкин М. Э. |