Статья "Сравнительный анализ ДНК, выделенной из листьев ча..."

Наименование статьиСравнительный анализ ДНК, выделенной из листьев чабреца разными способами
Страницы155
АннотацияАктуальность. Основой молекулярного анализа является ДНК высокого качества. Для ее выделения используют разные наборы или классические способы. Массовый анализ ДНК, при ее выделении с помощью наборов является дорогостоящим процессом. Поэтому целью нашего исследования был поиск относительно недорогого способа выделения ДНК хорошего качества из листьев разных сортов чабреца. Материалы и методы. Для исследований использовали листья растений чабреца (Thymus mastichina L. cорт ‘Светлячок’, T. striatus Vahl. сорт ‘Юбилейный’, T. vulgaris L. сорт ‘Фантазия’, T. vulgaris сорт ‘Ялос’), культивируемые в коллекции Никитского ботанического сада. C использованием световой микроскопии на поперечных срезах листьев изучали анатомическое строение органов, локализацию включений с эфирным маслом. Эфирное масло извлекали на аппаратах Гинзберга, фенольные соединения определяли с помощью реагента Фолина – Чокальтеу. ДНК выделяли с применением коммерческих наборов и классических способов с цетилтриметиламмоний бромидом (ЦТАБ) и поливинилпирролидоном (ПВП). Качество ДНК оценивали спектрофотометрически, с помощью электрофореза и ПЦР. Результаты. В мезофилле листовой пластинки четырех сортов чабреца выявляли включения с эфирным маслом. Содержание эфирного масла и фенольных соединений варьировало между сортами. Спектрофотометрический анализ показал, что классический способ с ЦTAБ и добавлением 2% ПВП позволяет получить ДНК хорошего качества длиной более 52000 пн. Заключение. Среди исследованных наборов и способов, ЦTAБ + 2% ПВП обеспечивал необходимый выход и качество ДНК, подходящей не только для ПЦР, но и, предположительно, для подготовки геномных библиотек. Относительно недорогие реагенты для этого метода делают его пригодным для будущего массового анализа растительного материала.
Ключевые словаThymus, сорта, листья, эфирное масло, фенолы, выделение ДНК.
ЖурналТруды по прикладной ботанике, генетике и селекции
Номер выпуска3
Автор(ы)Булавин И. В., Гребенникова О. А., Браилко В. А., Феськов С. А., Митрофанова И. В.