Статья "Сравнительный анализ ДНК, выделенной из листьев ча..."
Наименование статьи | Сравнительный анализ ДНК, выделенной из листьев чабреца разными способами |
---|---|
Страницы | 155 |
Аннотация | Актуальность. Основой молекулярного анализа является ДНК высокого качества. Для ее выделения используют разные наборы или классические способы. Массовый анализ ДНК, при ее выделении с помощью наборов является дорогостоящим процессом. Поэтому целью нашего исследования был поиск относительно недорогого способа выделения ДНК хорошего качества из листьев разных сортов чабреца. Материалы и методы. Для исследований использовали листья растений чабреца (Thymus mastichina L. cорт ‘Светлячок’, T. striatus Vahl. сорт ‘Юбилейный’, T. vulgaris L. сорт ‘Фантазия’, T. vulgaris сорт ‘Ялос’), культивируемые в коллекции Никитского ботанического сада. C использованием световой микроскопии на поперечных срезах листьев изучали анатомическое строение органов, локализацию включений с эфирным маслом. Эфирное масло извлекали на аппаратах Гинзберга, фенольные соединения определяли с помощью реагента Фолина – Чокальтеу. ДНК выделяли с применением коммерческих наборов и классических способов с цетилтриметиламмоний бромидом (ЦТАБ) и поливинилпирролидоном (ПВП). Качество ДНК оценивали спектрофотометрически, с помощью электрофореза и ПЦР. Результаты. В мезофилле листовой пластинки четырех сортов чабреца выявляли включения с эфирным маслом. Содержание эфирного масла и фенольных соединений варьировало между сортами. Спектрофотометрический анализ показал, что классический способ с ЦTAБ и добавлением 2% ПВП позволяет получить ДНК хорошего качества длиной более 52000 пн. Заключение. Среди исследованных наборов и способов, ЦTAБ + 2% ПВП обеспечивал необходимый выход и качество ДНК, подходящей не только для ПЦР, но и, предположительно, для подготовки геномных библиотек. Относительно недорогие реагенты для этого метода делают его пригодным для будущего массового анализа растительного материала. |
Ключевые слова | Thymus, сорта, листья, эфирное масло, фенолы, выделение ДНК. |
Журнал | Труды по прикладной ботанике, генетике и селекции |
Номер выпуска | 3 |
Автор(ы) | Булавин И. В., Гребенникова О. А., Браилко В. А., Феськов С. А., Митрофанова И. В. |