| Аннотация | В статье представлены результаты паспортизации двух трофовариантов линий клеток МDВК традиционным методом и проточной цитометрией. Объектом исследования являлись тест-культуры MDBK-E и МDВК-В, прошедшие соответственно 30 и 43 пассажа после криоконсервирования. Широко используемый на практике традиционный метод аттестации перевиваемых линий клеток достаточно трудоёмок и требует значительных затрат труда, средств и времени. Метод проточной цитометрии базируется на широком спектре цитохимических и флуоресцентных способов анализа размеров, гранулярности, фаз клеточного цикла, структурных компонентов (ДНК, РНК, белка), апоптоза клеток и ряда других показателей. Экспериментально установлено, что сублинии клеток MDBK-E и MDВК-В различались по культур альным, цитоморфологическим и кариологическим показателям, а также по контаминации посторонними агентами и чувствительности к вирусам парагриппа-3 и инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота. Анализ гистограмм распределения клеток в зависимости от содержания ДНК свидетельствовал о том, что по показателю апоптоза исследуемые линии MDBK-E и MDВК-В не превышали нормативного показателя и находились на уровне 3,9 и 6,8% соответственно. Клетки линии MDBK-E не содержали вирусной и микоплазменной контаминации, характеризовались выраженным ростовым потенциалом, сохраняли исходную морфологию клеток и являлись наиболее перспективным субстратом для производства антигенов парагриппа-3, инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота. Анализ результатов распределения гранулярности свидетельствовал о нарушении процессов деления и появлении в популяции сублинии MDВК-В аномальных клеток, а также о неадекватных условиях поддержания тест-культуры. Установлено, что метод проточной цитометрии является объективным и достаточно перспективным при выборе культуральных моделей, отвечающих требованиям отечественных и международных стандартов. Выявленная корреляция между величиной апоптоза, культур альными свойствами и показателями клеточного цикла позволяют расценивать биологические свойства культуры-продуцента как один из ведущих факторов изменения программированной клеточной гибели. Изменение показателя программированной клеточной гибели лежит в основе ряда важнейших патологических состояний и дегенеративных процессов. |
|---|