| Аннотация | Известно, что молоко является одним из факторов передачи восприимчивому крупному рогатому скоту ретровирусной инфекции, в данном случае индуцированной вирусом лейкоза крупного рогатого скота (ВЛКРС). С другой стороны, одним из важнейших аспектов изучения биологических свойств ВЛКРС является потенциальная способность вируса поражать ксеногенные виды животных, в том числе и человека [1], употребляющего в пищу продукты животноводства и тесно контактирующего с крупным рогатым скотом в процессе хозяйственной деятельности. В молоке могут присутствовать лейкоциты с интегрированной провирусной ДНК, продуцирующие зрелые вирионы ВЛКРС и непосредственно сами зрелые вирионы, поступившие из кровотока в процессе образования молока. Применение молекулярной диагностики данного биологического материала позволит эффективнее отслеживать зараженную молочную продукцию в хозяйствах. Однако, выявление провирусной ДНК ВЛКРС в молоке, важно не только для здоровья человека, но и для животных. Поскольку часть продукции используется непосредственно на фермах, например, для выпаивания молодняка. В связи с этим, нами предпринята оптимизация методики исследования молока на наличие провирусной ДНК ВЛКРС. При отборе проб молока снижен риск ятрогенного фактора. В статье представлены результаты анализа молока от 5 серопозитивных коров голштинской породы методом молекулярной диагностики полимеразной цепной реакции в реальном времени (ПЦР-РВ). При оптимизации способа пробоподготовки молока удаляли казеин и другие примеси, являющиеся ингибиторами реакции амплификации, с целью уменьшения их влияния, образцы подвергали центрифугированию при различных режимах. Для экстракции провирусной ДНК использовали несколько техник выделения нуклеиновой кислоты. По итогам проведенных исследований зарегистрировали положительный результат амплификации у 1 из 5 животных. При этом, данный положительный результат обнаружен в пробирках с пробами комплементарной ДНК (кДНК), то есть РНК выделеной как из фракции " белого кольца" с лейкоцитами и моноцитами, так и из клеток осадка. |
|---|